动物性食品中氨丙啉残留量测定的前处理方法 依据SN/T 4583-2016

　　【仪器设备网 专题推荐】氨丙啉是一类抗球虫药，因为不规范运用，抗球虫药长期性、持续性添加在饲料中，非常容易导致药物在肉及蛋品中的残留现象，伤害人的身体健康。本文论述了如何把氨丙啉从样品基质中分离提取出来，并经过净化后，转变成液质联用仪可以检验的形式。以提取、净化为重点，依据行标SN/T4583-2016，为检验人员和相关行业科研人员提供相应的借鉴。

　　检测项目：氨丙啉

　　应用范围：鸡肉、鸡肝、鸡肾、鸡蛋、牛肉、牛肝、牛肾、牛脂肪和牛奶

　　液相色谱-质谱/质谱法

　　方法原理：试样中的氯丙啉用1 %三氯乙酸-乙腈溶液(3+7)提取，经HLB固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。

　　前处理仪表仪器：

　　分析天平(感量0.01 g 和0.1 mg);均质器(15000 r/min);离心机(5000 r/min);涡旋振荡器;氮吹仪;具塞塑料离心管(50 mL)，比色管(50 mL)。

　　检测仪器：LC-MS/MS+ESI源

　　#样品的制备、保存与要求#

　　1.肌肉、肝脏、肾脏、鸡蛋、脂肪

　　取样品中又代表性的可食部分约500 g，用粉碎机粉碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于零下18 ℃ 冰箱内保存。

　　2.牛奶

　　从所取全部样品中取出有代表性样品500 mL，充分混匀，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于4 ℃ 以下冷藏存放。

　　制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

　　前处理方法

　　1.提取

　　称取试样约5 g(精确到0.01 g )于50 mL塑料离心管中，加入20 mL 1 %三氯乙酸-乙腈溶液(3+7)，15000 r/min均质提取1 min，5000 r/min离心5 min，上清液转移至50 mL比色管中，残渣再用20 mL三氯乙酸-乙腈溶液重复提取一次，合并提取液于比色管中，定容至刻度，混匀。提取液经滤纸过滤后待净化。

　　2.净化

　　分取10 mL提取滤液，于45 ℃ 氮气吹至约3 mL，加入2 mL正己烷，涡旋振荡30 s，5000 r/min离心5 min，弃去正己烷层，下层溶液以小于2 mL/min流速过HLB柱(6 cc/500 mg，6 mL甲醇和6 mL水活化)，3 mL水洗涤样品管后上柱，再用6 mL水淋洗小柱，抽干10 min，以6 mL甲醇洗脱并收集，洗脱液在45 ℃氮气吹干，用1.0 mL定容液(乙酸铵-乙腈溶液4+6)溶解，过0.2 μm滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱分析。

　　国标解读及注意事项

　　1.盐酸氨丙啉标准物质先用水溶解，再用乙腈定容，配成溶液浓度以氯丙啉计为100 μg/mL的标准储备液。

　　2.本方法使用1 %三氯乙酸-乙腈溶液提取目标化合物，正己烷除脂，HLB柱富集净化，稀释倍数=5，相当于1 g试料进行上机检测。

　　3.提取液先用氮吹方法浓缩，乙腈挥发后，剩余水相用正己烷除脂后，再过柱净化。

　　4.固相萃取过程中需要控制流速，使溶液一滴一滴地流下，以保证富集的效果。

　　5.本方法使用基质曲线进行定量分析，根据具体检测样品选取合适的基质制作kong白样品基质液。