水溶肥料中游离氨基酸含量的测定 液相色谱法 LC-5510液相色谱仪

　　【仪器信息网 行业应用】本文参考NY/T1975-2010，建立了柱前衍生-液相色谱法测定水溶肥料中游离氨基酸含量的方法。实验表明，改方法样品分离度好，重复性良好，而且结果准确，可满足标准的需求，供相关人员参考。

　　PART ONE实验部分

　　实验原理

　　试样用磺基水杨酸沉淀蛋白质后，用EDTA络合金属元素释放氨基酸，氨基酸经化学衍生后由液相色谱仪分离并测定天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸和精氨酸共17种氨基酸的含量，这些氨基酸含量的总和，即为肥料中游离氨基酸的含量。

　　仪器设备与试剂

　　LC-5510液相色谱仪(配UV检测器);

　　实验室常用分析设备;

　　氨基酸分析方法包;

　　磺基水杨酸溶液。

　　实验条件

　　色谱柱：Amino Acid，5μm，(4.6×250mm);

　　流动相：

　　流动相A：0.1mol/L醋酸钠溶液(pH6.5)：乙腈=93:7

　　流动相B：水：乙腈=20:80

　　流速：1.0 ml/min;

　　柱温：40℃;

　　波长：254nm;

　　进样量：20 µL。

　　洗脱溶剂梯度洗脱见下表。

　　样品处理

　　标准品衍生

　　分别精称标准品溶液160μL，置于试管中，加入稀释后的A溶液100μL和稀释后的B溶液100μL，摇匀，室温反应60min;然后加入正己烷溶液400μL，旋紧盖子后振摇10s，室温下静置分层，去下层200μL溶液，加入800μL水混合均匀，再取200μL加入800μL水混合均匀，用孔径为0.22μm的有机滤膜过滤，待分析;

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